Kesäloma alkaa ja Peppi perheineen suuntaa taas ponikartanoon, mukanaan ystävä Elsa. Tällä kertaa luvassa pitäisi olla vain leppoisaa lomanviettoa ponien parissa, mutta tilanne muuttuu, kun kartanossa näyttelyä ja maalauskurssia pitävän taiteilijan arvokas taulu katoaa yön aikana lukitusta salista.

Etsivätoimisto Ponikytät astuu taas remmiin ja alkaa jäljittää taidevarasta. Minne kadonnut maalaus on kätketty, ja kuka viatonta esittävistä kesävieraista onkaan syyllinen?

Tytöt tutkivat johtolankoja ja varjostavat epäiltyjä sen minkä ehtivät ponien hoidolta ja ratsastamiselta. Loppujen lopuksi ratkaisu on aivan heidän ulottuvillaan, ja taulu palautetaan oikealle omistajalleen. Mitähän jännää ja erityisesti ponityttöjä ilahduttavaa Matleenan mummu saa taiteilijalta kiitokseksi?